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CN116171323A 一种Thermobifida fusca角质酶突变体及其可溶性表达的方法
申请日：2020.06.10
IPC分类号：C12N15/55
公开日：20230526
申请人：江南大学
发明人：吴敬;王蕾;朱方剑;陈晟
一种Thermobifida fusca角质酶突变体及其可溶性表达的方法
本发明公开了一种Thermobifida fusca角质酶突变体及其可溶性表达的方法，属于酶工程技术领域。本发明将突变体D204C/E253C和周质蛋白二硫键异构酶DsbC在大肠杆菌突变株E.coli Origami B(DE3)中共表达，但获得的重组菌E.coli Origami B(DE3)/pSCDsbC‑D204C/E253C在表达过程中，易错误折叠形成大量包涵体，可溶表达比率极低。本发明进一步通过与分子伴侣蛋白DsbC在大肠杆菌突变株E.coli Origami B(DE3)中的共表达，实现了角质酶突变体D204C/E253C的高效可溶性表达，具有一定的工业应用前景。
申请号：CN202080101956.4
公开（公告）号：CN116171323A
申请日：2020.06.10
公开（公告）日：20230526
优先权：20200610 CN PCT/CN2020/095350
同族：中国$美国$世界知识产权组织(WIPO)
同族引用文献：6
同族施引专利：0
申请人：江南大学
申请人地址：214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号
权利人：江南大学
权利人地址：214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号
发明人：吴敬;王蕾;朱方剑;陈晟
代理机构：哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司
代理人：仇钰莹
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一种热稳定性强的角质酶突变体，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
一种热稳定性强的角质酶突变体，在SEQ ID NO.1所示的角质酶的基础上，对以下至少一个位点的氨基酸进行突变：第61位、第89位、第204位、第253位。
表达所述角质酶突变体的微生物细胞。
一种可溶性表达所述角质酶突变体的方法，其特征在于，将权利要求1～3任一所述的所述角质酶突变体与周质蛋白二硫键氧化还原酶DsbC共表达。
一种对PET纤维或其织物的改性方法，其特征在于，将所述角质酶突变体以≥10U/g底物的剂量对PET纤维在50～80℃进行酶解。