CN101157729B 一种肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体及其应用
申请日:2007.10.23
IPC分类号:C07K19/00
公开日:20110112
申请人:南京大学
发明人:华子春;曹林
一种肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体及其应用
生物技术
如何在肿瘤治疗时,避免肿瘤坏死因子相关凋亡配体对其它组织的毒副作用
通过基因工程方法构建由αVβ3、αVβ5整合素的配体、连接肽、肿瘤坏死因子相关凋亡配体组成的肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体融合蛋白质,即利用常规基因工程方法通过人工合成或者克隆构建肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体的编码基因、可溶性地重组表达和简便地分离纯化。
更好的肿瘤组织靶向性、抗肿瘤效果;更低的使用剂量;便于表达和生产、可溶性的表达和简易的分离纯化
申请号:CN200710133862.1
公开(公告)号:CN101157729B
申请日:2007.10.23
公开(公告)日:20110112
优先权:
同族:中国$美国$欧洲专利局(EPO)$日本$世界知识产权组织(WIPO)$德国
同族引用文献:2
同族施引专利:18
申请人:南京大学
申请人地址:210097 江苏省南京市汉口路22号
权利人:南京大学
权利人地址:210097 江苏省南京市汉口路22号
发明人:华子春;曹林
代理机构:南京知识律师事务所
代理人:胡锡瑜
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1.一种肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体,其特征是由αVβ3和αVβ5整合素的配体肽段、连接肽、肿瘤坏死因子相关凋亡配体构建而成的肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体融合蛋白质,其中αVβ3和αVβ5整合素的配体肽段为一种带有环柄状结构并含有RGD序列的短肽ACDCRGDCFC,连接肽为5个甘氨酸,肿瘤坏死因子相关凋亡配体是指人的肿瘤坏死因子相关凋亡配体,获得所述肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体的PCR引物分别为:5’-TGCAGATCATATGGCATGCGACTGCCGTGGTGACTGCTTCTGCGGTGGTGGTGGTGGTGTGAGAGAAAGAGGTCCTCAG-3’和5’-ATGGATCCTTAGCCAACTAAAAAGGCCC-3’。
4.一种肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体在大肠杆菌中可溶性表达的方法,其特征是权利要求1所述的肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体的大肠杆菌重组表达菌株在低温下进行培养和诱导表达,其中低温是指10℃-35℃。
5.一种肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体的分离纯化方法,其特征是权利要求1所述的肿瘤坏死因子相关凋亡配体变体通过金属亲和层析和离子交换层析获得纯化。

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